Эмбриотрансфер и вспомогательные репродуктивные технологии
На базе НИИ Фармакологии живых систем создана и успешно функционирует «Лаборатория геномного редактирования в ветеринарии и биомедицине». Лаборатория оснащена полным набором оборудования и инструментов, необходимых для выполнения манипуляций с репродуктивным материалом лабораторных животных.
В лаборатории отработаны и регулярно применяются технологии редактирования генома мышей и кроликов методом микроинъекции генетической конструкции в пронуклеус эмбрионов на стадии зиготы, полученных от самок-доноров, с последующей трансплантацией эмбрионов самкам-реципиентам. После получения первичных трансгенных животных проводится подтверждение и закрепление целевой мутации в первом поколении, а затем обеспечивается её стабильное поддержание на генетическом фоне инбредных или аутбредных линий в зависимости от поставленных исследовательских задач.
Используемые методологии позволяют проводить доклинические исследования полного цикла, включая оценку эффективности подходов генной терапии при орфанных заболеваниях, где создание и валидация генетически модифицированных моделей является ключевым и зачастую незаменимым этапом.
Таким образом, на базе НИИ Фармакологии живых систем обеспечена возможность создания мышей и кроликов с заданными геномными модификациями для последующего использования в доклинических исследованиях препаратов генной терапии.
Кроме того, лабораторная инфраструктура позволяет оценивать влияние исследуемых соединений на эмбриональное развитие, включая изучение потенциальной эмбриотоксичности на различных этапах эмбриогенеза (ранние и поздние фазы), что расширяет возможности комплексной доклинической оценки безопасности.
Отдельно следует отметить, что компетенции лаборатории в области переноса и трансплантации эмбрионов могут быть востребованы и в доклинических исследованиях, направленных на повышение эффективности эмбриотрансфера и улучшение исходов трансплантаций в циклах ЭКО, включая оценку факторов, влияющих на приживление эмбриона и успешность имплантации как в услови
Задачи, решаемые направлением
Разработка и получение генетически модифицированных моделей животных, релевантных заданной биомишени и патогенетическому механизму
В рамках направления обеспечивается создание нокаут/нокин мутаций, моделей с точечными мутациями, а также гуманизированных и репортерных линий, выбираемых в зависимости от научной гипотезы и дизайна доклинического исследования. Отдельной задачей является создание моделей орфанных заболеваний и редких моногенных дефектов для воспроизведения ключевых фенотипических проявлений и последующей оценки терапевтических вмешательств.
Выбор биологического объекта исследования (мышь/кролик) в соответствии с требованиями доклинической программы
Направление решает задачу подбора вида лабораторного животного с учетом фармакокинетических и фармакодинамических характеристик исследуемого вещества, анатомо-физиологических особенностей, доступности целевого биоматериала для аналитических методов, а также требований к воспроизводимости и информативности фенотипа мутации.
Формирование генетических линий и обеспечение воспроизводимости экспериментальных серий
После получения первичных трансгенных животных выполняется закрепление целевой мутации в первом поколении (F1) и ее последующая стабилизация на генетическом фоне инбредных либо аутбредных линий в соответствии с целями проекта. Одномоментно решается задача формирования экспериментальных когорт в зависимости от мощности эксперимента как в условиях spf, так и конвенционального вивария. Возможна длительная поддержка линий на протяжении полного доклинического цикла.
Доклиническая оценка репродуктивной безопасности и рисков для фертильности
Направление включает проведение исследований, направленных на оценку репродуктивной токсикологии, включая анализ потенциальных рисков для фертильности. Дополнительно решаются задачи доклинческой оценки влияния кандидатов на качество эмбрионов, исходы переноса и ранние репродуктивные потери.
Доклинические исследования на стыке фармакологии и репродуктивной медицины
Компетенции в области трансплантации эмбрионов позволяют решать задачу экспериментальной верификации факторов, влияющих на приживление и успешность имплантации, а также проводить доклиническую оценку соединений и биопрепаратов, потенциально повышающих эффективность эмбриотрансфера. Данное направление обеспечивает формирование модельной доказательной базы для последующей трансляции подходов в клинические протоколы вспомогательных репродуктивных технологий.
